聯(lián) 系 人:段煜
電 話:15214379366
手 機:16602115336
地 址:上海市崇明縣長興鎮(zhèn)潘園公路1800號2號樓9703室(上海泰和經(jīng)濟發(fā)展區(qū))
郵 編:201913
傳 真:021-80186165
郵 箱:435399850@qq.com
阿儀網(wǎng)商鋪:http://www.app17.com/c110001/
手機網(wǎng)站:m.jwswbio.com
本公司7月11日14時58分報道:(http://www.app17.com/c110001/products/d11539328.html)
人可溶性半乳糖凝集素 3 結合蛋白(LGALS3BP)ELISA 檢測試劑盒
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人可溶性半乳糖凝集素3結合蛋白(LGALS3BP)捕獲抗體的包被微 孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹 底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色, 并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人可溶性半乳糖凝集素3結合蛋白(LGALS3BP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地
分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于
-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 預處理后的樣本無需稀釋,直接取 10μL 加樣即可。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
標準品 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
自封袋 | 1 個 | 1 個 | 無 |
注:標準品濃度依次為:80、40、20、10、5、0 ng/mL.
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
結果判斷
繪制標準曲線:在 Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD 值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù) R 值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:檢測濃度小于 0.1 ng/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于 10%、板間變異系數(shù)小于 15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 個月
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷
更新時間:2024/5/24 11:45:35
首 頁| 公司介紹| 產(chǎn)品展示| 公司新聞| 榮譽證書| 資料下載| 技術文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言
阿儀網(wǎng) 設計制作,未經(jīng)允許翻錄必究. 聯(lián)系人:段煜 聯(lián)系電話:15214379366 ICP備案號:滬ICP備15046135號-2 總訪問量:4138837 管理登錄
主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,標準品,細胞株,抗體,生物試劑,化學試劑,培養(yǎng)基,血清,實驗耗材,ABcam抗體,CST抗體,Santa抗體,ATCC細胞株,人elisa檢測試劑盒,小鼠elisa試劑盒,大鼠elisa試劑盒,牛elisa試劑盒,羊elisa試劑盒,豬elisa試劑盒,犬elisa試劑盒,植植物elisa試劑盒,elisa 檢測試劑盒報價,試劑盒批發(fā),免費代測elisa 試劑盒,細胞株供應商,實驗外包
掃一掃,關注我們