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通用型細胞核形態(tài)染色/細胞凋亡檢測試劑盒
主要用途
通用型細胞核形態(tài)染色/細胞凋亡檢測試劑是一種旨在通過熒光染料與DNA特異性結(jié)合，呈現(xiàn)藍色，用于分析和觀察細胞核形態(tài)或DNA含量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞核（動物、人體、植物、昆蟲等）的觀察�？梢员挥糜诩毎芷�、細胞凋亡、細胞流式儀分析等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，熒光清晰，操作簡捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
赫斯特染料（Hoechst 33258）為特異性 DNA 活性染料，與 A-T 鍵結(jié)合，這種染料對死細胞或固著細胞可立即染色。而活細胞的著色是漸進性的，在 10 分鐘內(nèi)可達飽和。在熒光顯微鏡下，活細胞核呈彌散均勻熒光，出現(xiàn)細胞凋亡時，細胞核或細胞質(zhì)內(nèi)可見濃染致密的顆粒塊狀熒光。在紫外光激發(fā)下，呈現(xiàn)明亮的藍色熒光。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液（Reagent A） 毫升
反應(yīng)液（Reagent B） 毫升
染色液（Reagent C） 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存染色液（Reagent C）在－20℃冰箱里，用鋁箔封裹，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效bao證6月
用戶自備
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于細胞脫離
wan全細胞培養(yǎng)液（G&VS12052）：用于中和胰蛋白酶的處理
15毫升錐形離心管：用于細胞收集的容器
1.5毫升離心管：用于細胞染色的容器
微型臺式離心機：用于細胞收集的操作
倒置熒光顯微鏡：用于觀察細胞核形態(tài)
細胞流式儀：用于細胞熒光分析
實驗步驟
實驗開始前，從－20℃冰箱里取出染色液（Reagent C），置入冰槽里融化。移出xx微升反應(yīng)液（Reagent B）和xx微升染色液（Reagent C）到新的1.5毫升離心管，混勻后標(biāo)記為染色工作液。然后進行下列操作。
一、 直接法
1． 準(zhǔn)備1個細胞培養(yǎng)12孔板的待測細胞，每孔鋪滿率達70％（約30萬細胞數(shù)）
2． 小心抽去細胞培養(yǎng)液
3． 輕輕沿著孔壁加入xx毫升 清理液（Reagent A）到細胞培養(yǎng)孔，覆蓋培養(yǎng)孔表面
4． 小心抽去xx毫升 清理液（Reagent A）
5． 加入xx微升含有反應(yīng)液（Reagent B）和染色液（Reagent C）的染色工作液， 覆蓋培養(yǎng)孔表面
6． 在暗室里室溫下孵育2分鐘
7． 即刻在倒置熒光顯微鏡下進行觀察：紫外波長350nm（細胞核呈現(xiàn)藍色）
二、間接法
1． 準(zhǔn)備1個細胞培養(yǎng)12孔板的待測細胞，每孔鋪滿率達70％（約30萬細胞數(shù)）
2． 小心移出細胞培養(yǎng)液到15毫升錐形離心管（收集懸浮細胞）
3． 加入xx毫升 清理液（Reagent A）到細胞培養(yǎng)孔，覆蓋培養(yǎng)孔表面
4． 小心移出xx毫升 清理液（Reagent A）到15毫升錐形離心管（收集洗脫細胞）
5． 加入500微升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個培養(yǎng)孔表面
6． 放進37℃培養(yǎng)箱孵育1分種
7． 輕輕手擊震動培養(yǎng)板，使細胞脫落
8． 加入1毫升用戶自備的wan全細胞培養(yǎng)液
9． 移入15毫升錐形離心管
10． 放進臺式離心機離心5分鐘，速度為300g
11． 小心抽去上清液
12． 加入xx微升清理液（Reagent A）
13． 用200微升槍頭上下輕柔抽吸，混勻細胞顆粒群
14． 轉(zhuǎn)入到1.5毫升離心管或細胞流式儀專用測試管
15． 加入xx微升含有反應(yīng)液（Reagent B）和染色液（Reagent C）的染色工作液
16． 輕度渦旋震蕩2秒
17． 在暗室里室溫下孵育2分鐘
18． 即刻移取50微升在載玻片上壓片，
19． 在倒置熒光顯微鏡下進行觀察：紫外波長350nm（細胞核呈現(xiàn)藍色）
20． 或即刻進行細胞流式儀分析：紫外波長350nm，觀察50000個細胞以上
注意事項
1． 本產(chǎn)品為100次（8個12孔細胞培養(yǎng)板）操作
2． 所有操作均須無菌狀態(tài)下進行
3． 確保實驗準(zhǔn)確性，須收集所有懸浮和貼壁細胞；同時要確保足夠的細胞數(shù)
4． 可用35mm培養(yǎng)皿、6孔培養(yǎng)板或25cm2細胞培養(yǎng)瓶操作，相應(yīng)增加染色液的用量。但12孔培養(yǎng)板為理想選擇
5． 操作時，須戴手套
6． 孵育時，須避免光照
7． 建議細胞染色完成后，即刻進行分析；若暫不觀察，可保存在4℃冰箱里，但不宜超過1周
8． 細胞核呈現(xiàn)多個散在塊狀結(jié)構(gòu)，為細胞凋亡
9． 細胞流式儀分析前，須混勻內(nèi)容物
10． 細胞流式儀分析，細胞檢測量不得少于10000個
11． 告知流式儀技術(shù)員有關(guān)細胞類型
12． 本公司提供系列細胞核染色分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰
使用cheng諾
極威生物秉著“信譽至上、客戶滿意、質(zhì)量cheng諾”的宗旨為我們的用戶提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后，應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定，bao證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題，請立即以書面形式（實驗報告）與本公司聯(lián)系，并將該產(chǎn)品退回，經(jīng)檢驗確系產(chǎn)品質(zhì)量所致，本公司負責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯誤操作所致，本公司不承擔(dān)由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購信息
單組分訂購信息
編號 名稱 規(guī)格
G&VS10023.1 通用型細胞核形態(tài)/細胞凋亡檢測染色試劑盒 100次
G&VS10023.1A 清理液（Reagent A） 毫升
G&VS10023.1B 反應(yīng)液（Reagent B） 毫升
G&VS10023.1C 染色液（Reagent C） 毫升
G&VS12024 胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液 毫升
G&VS12052 DMEM完quan細胞培養(yǎng)基 毫升
試劑盒訂購信息
| 產(chǎn)品編號 | 名稱 | 規(guī)格 |
| G&VS10023.1 | 通用型細胞核形態(tài)染色/細胞凋亡檢測試劑盒 | 100次 |
| G&VS10023.2 | PROPIDIUM IODIDE細胞核形態(tài)染色/細胞凋亡檢測試劑盒 | 100次 |
| G&VS10023.3 | CHROMOMYCIN A3細胞核形態(tài)染色/細胞凋亡檢測試劑盒 | 50次 |
| G&VS10023.4 | 吖啶橙（acridine orange）細胞凋亡染色試劑盒 | 50次 |
| G&VS10092.1 | HOECHST 33342和PROPIDIUM IODIDE細胞膜變檢測試劑盒 | 50次 |
| G&VS10092.2 | 吖啶橙（acridine orange）和溴化乙錠（ethidine bromide）雙染細胞凋亡檢測試劑盒 | 50次 |
| G&VS10092.3 | 吖啶橙（Acridine Orange）/赫斯特33342（HOECHST33342）雙染細胞凋亡檢測試劑盒 | 50次 |
| G&VS10092.4 | 吖啶橙（Acridine Orange）/碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）雙染細胞凋亡檢測試劑盒 | 50次 |
原創(chuàng)作者：上海極威生物科技有限公司
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