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技術文章

上海人細胞毒素相關蛋白A(CagA)ELISA檢測試劑盒介紹

點擊次數(shù):17216   發(fā)布時間:2021/2/25 19:41:56

 本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷

人細胞毒素相關蛋白ACagAELISA檢測試劑盒

使用說明書

檢測原理

試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人細胞毒素相關蛋白ACagA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人細胞毒素相關蛋白ACagA)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項

1.  試劑盒保存在2-8℃,使用室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正,F(xiàn)象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用充分搖勻。

原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司

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