聯(lián) 系 人：段煜
電 話：15214379366
手 機(jī)：16602115336
地 址：上海市崇明縣長(zhǎng)興鎮(zhèn)潘園公路1800號(hào)2號(hào)樓9703室（上海泰和經(jīng)濟(jì)發(fā)展區(qū)）
郵 編：201913
傳 真：021-80186165
郵 箱：435399850@qq.com
阿儀網(wǎng)商鋪：http://www.app17.com/c110001/
手機(jī)網(wǎng)站：m.jwswbio.com
點(diǎn)擊次數(shù)：17647 發(fā)布時(shí)間：2016/10/9 9:23:21
本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷
大鼠白介素 18（IL-18）ELISA 檢測(cè)試劑盒使用說明書
檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被大鼠白介素18（IL-18）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠白介素18（IL-18）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘
取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正�，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 預(yù)理后的樣本無需稀釋，直接取 10μL 加樣即可。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
名稱 96 孔配置 48 孔配置 備注
微孔酶標(biāo)板 12 孔×8 條 12 孔×4 條 無
標(biāo)準(zhǔn)品 0.3mL 0.3mL 無
樣本稀釋液 6mL 3mL 無
檢測(cè)抗體-HRP 10mL 5mL 無
20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書進(jìn)行稀釋
底物 A 6mL 3mL 無
底物 B 6mL 3mL 無
終止液 6mL 3mL 無
封板膜 2 張 2 張 無
說明書 1 份 1 份 無
自封袋 1 個(gè) 1 個(gè) 無
注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：160、80、40、20、10、5 pg/mL.
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5 次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本 10μL，再加樣本稀釋液 40μL；
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板 5 次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD 值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在 Excel 工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD 值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：檢測(cè)濃度小于 1.0 pg/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于 15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6 個(gè)月
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
原創(chuàng)作者：上海極威生物科技有限公司
首 頁| 公司介紹| 產(chǎn)品展示| 公司新聞| 榮譽(yù)證書| 資料下載| 技術(shù)文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言
阿儀網(wǎng) 設(shè)計(jì)制作，未經(jīng)允許翻錄必究.
聯(lián)系人：段煜 聯(lián)系電話：15214379366 ICP備案號(hào)：滬ICP備15046135號(hào)-2
總訪問量：4028875 管理登錄
主營(yíng)產(chǎn)品：ELISA試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品，細(xì)胞株，抗體，生物試劑，化學(xué)試劑，培養(yǎng)基，血清，實(shí)驗(yàn)耗材，ABcam抗體，CST抗體，Santa抗體，ATCC細(xì)胞株，人elisa檢測(cè)試劑盒，小鼠elisa試劑盒，大鼠elisa試劑盒，牛elisa試劑盒，羊elisa試劑盒，豬elisa試劑盒，犬elisa試劑盒，植植物elisa試劑盒，elisa 檢測(cè)試劑盒報(bào)價(jià)，試劑盒批發(fā)，免費(fèi)代測(cè)elisa 試劑盒，細(xì)胞株供應(yīng)商，實(shí)驗(yàn)外包
掃一掃，關(guān)注我們
王小姐
